質粒中提試劑盒是一種用于從大腸桿菌等細菌中快速、高效提取中量質粒DNA的試劑盒,適用于多數(shù)細胞轉染實驗相貫通、文庫篩選不斷發展、體外翻譯等常規(guī)分子生物學操作。
質粒中提試劑盒操作步驟(以常見試劑盒為例)
細菌收集:取5-30ml過夜培養(yǎng)的菌液自動化方案,加入離心管中緊密協作,使用常規(guī)臺式離心機離心,盡量吸除上清線上線下。
細胞裂解:向有菌體沉淀的離心管中加入重懸液(如Solution I)發揮重要作用,懸浮細菌沉淀。然后加入裂解液(如Solution II)數據顯示,溫和地上下翻轉使菌體充分裂解高質量。此時菌液應變得清亮粘稠。
中和與沉淀:加入中和液(如Solution III)記得牢,立即溫和地上下翻轉充分混勻延伸,此時將出現(xiàn)白色絮狀沉淀。離心后服務好,將上清液轉移到吸附柱中新趨勢。
DNA吸附與洗脫:將上清液加入吸附柱中,離心后棄廢液共謀發展。然后加入漂洗液(如DNA Wash Buffer)進行漂洗學習,以去除殘留的雜質。最后聽得懂,將吸附柱置于干凈的離心管中應用優勢,加入洗脫緩沖液(如Elution Buffer)進行洗脫,收集質粒DNA溶液便利性。