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    觸酶試驗酶液制備的實(shí)驗步驟

    點(diǎn)擊次數(shù):2055 更新時間:2022-10-27
      觸酶試驗是關(guān)于觸酶的一個實(shí)驗做法高產。大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過氧化氫酶,但鏈球菌屬陰性發揮作用,故常用此試驗來鑒定良好。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗,結(jié)核分枝桿菌為陰性銘記囑托,戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽性引領。
     
      觸酶試驗酶液的制備:
     
      1.稱取葉片 0.25g ,加入5倍量的(M/V)pH7.0 的PBS冰浴研磨 15000r/min
     
      離心15min取部分上清液經(jīng)適當(dāng)稀釋后用于酶活性測定示範。
     
      2.CAT活性的測定
     
      在3ml的反應(yīng)體系中應用前景,包括0.3% H2021ml, H20 1.95ml, 最后加入0.05ml酶液
     
      啟動反應(yīng),測定波長240nm處的OD降低速度運行好。將每分鐘OD減少0.01定義為1個活力單位首次。
     
      3.POD活性的測定
     
      在3ml的反應(yīng)體系中,包括0.3% H2021ml, .0.2% 愈創(chuàng)木酚0.95ml,pH7.0的PBS 1ml進一步意見,最后加入0.05ml酶液啟動反應(yīng)增幅最大,記錄470nm處OD增加速度。將每分鐘OD增加0.01定義為1個活力單位生產能力。
     
      4. 用考馬斯亮藍(lán) G-250法測定蛋白含量標準。
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